Inducción con cobre de la enzima lacasa en el hongo de pudrición blanca Trametes villosa (sw.: Fr.) Kreisel
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Resumen
Los hongos de pudrición blanca presentan interés en aplicaciones biotecnológicas y son capaces de producir enzimas extracelulares como lacasa. La lacasa es una fenoloxidasa, con peso molecular entre 60 y 80 kDa, cuya expresión génica puede ser inducible, reflejando probablemente las diferentes funciones fisiológicas de esta enzima. Este trabajo se enfoca en la capacidad oxidativa de colorantes en medio sólido de T. villosa (ensayos de decoloración) y en el efecto del CuSO4 como inductor sobre la capacidad de secreción enzimática y la expresión génica de lacasa en Trametes villosa BAFC 2755 en medio líquido. Los ensayos de decoloración en medio sólido mostraron una excelente capacidad degradativa frente a azul de bromofenol, verde de malaquita y licor negro a pH ácido. Los ensayos de actividad enzimática confirmaron la producción de lacasa extracelular inducible con CuSO4. Las proteínas totales secretadas mostraron un incremento significativo en presencia de CuSO4, observándose en SDS–PAGE un aumento de la fracción proteica entre 60 y 70 kDa. Los niveles de mRNA mostraron un claro incremento en presencia del inductor. Estos resultados demuestran que el Cu2+ produce un incremento de la actividad lacasa en Trametes villosa, y que este aumento podría deberse a un aumento en la cantidad de proteína y mRNA.
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