DETECCIÓN MOLECULAR DEL GENOMA DEL VIRUS DE LA FIEBRE AMARILLA EN MOSQUITOS AEDES AEGYPTI
Barra lateral del artículo
Contenido principal del artículo
Resumen
La detección de mosquitos infectados con el virus de la Fiebre Amarilla permite establecer estudios de vigilancia temprana en campo y diversos análisis en el laboratorio. En este trabajo se desarrolla y optimiza un protocolo para la detección del genoma del virus de la Fiebre Amarilla en mosquitos Aedes aegypti. En la extracción de ARN total se utilizó un protocolo convencional combinado con una purificación con micropartículas de sílica. Para la detección, se amplificó por RT-PCR seminested una región de 281 pb del gen NS1, lográndose una sensibilidad límite de 2,1 x 104 PFU/ ml y un número máximo admitido de 15 mosquitos por muestra.
Descargas
Detalles del artículo
La Revista de Ciencia y Tecnología sostiene su compromiso con las políticas de Acceso Abierto a la información científica, al considerar que tanto las publicaciones científicas como las investigaciones financiadas con fondos públicos deben circular en Internet en forma libre y gratuita. Los trabajos publicados en la Revista de Ciencia y Tecnología están bajo la licencia Creative Commons Atribución-NoComercial 2.5 Argentina.
Citas
Gerlich, W. Introduction to this Special Issue on Flaviviridae, Clin. Diag. Virol. 10: p. 91-95. 1998.
Woodring, J. L.; Higgs, S.; Beaty, B. J. The Biology of Disease Vectors. Beaty B. J. & Marquardt W. C. Editor. University Press of Colorado. p. 51-72. 1996.
Vainio, J.; Cutts, F. Yellow Fever. WHO, Geneva. 1998.
Monath, T. P. The Arboviruses: Epidemiology and Ecology, CRC Press, Boca Raton, USA, (I). 1988.
Gubler, D. J. Dengue and Dengue Hemorrhagic Fever, Clin. Microbiol. Rev. 11: p480–496. 1998.
Van der Stuff, P.; Gianella, A.; Pirard, M.; Cespedes, J.; Lora, J.; Peredo, J. L.; Vorndam, V.; Boeleaert, M. Urbanization of Yellow Fever in Santa Cruz, Bolivia, The Lancet, 353 (8): p. 1558-1562. 1999.
Carballal, G.; Oubina, J. R., Virología Médica. El Ateneo, Buenos Aires, 2 ed. 1999.
Chow, V.; Chan, Y.; Yong, R.; Lee, M.; Lim, L.; Chung, Y.; Lam-Phua, S.; Tan, B. Monitoring of Dengue Viruses in Field Caught Aedes aegypti and Aedes albopictus Mmosquitoes by a Type-Specific Polymerase Chain Reaction and Cycle Sequencing. Am. J. Trop. Med. Hyg, 58(5), p: 578-586. 1998.
Lanciotti, R. S.; Calisher, C. H.; Gubler, D. J.; Chang, G. J.; Vorndam, V. Rapid Detection and Typing of Dengue Viruses from Clinical Samples by Using Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction, J. Clin. Virol. 30, p: 545-551. 1992.
Chang, G. J.; Trent, W. D.; Vorndam, A. V.; Vergne, E.; Kinney, R. M.; Mitchell, C. J. An Integrated Target Sequence and Signal Amplification Assay, Reverse Transcriptase-PCR-Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay, to Detect and Characterize Flavivirus, J Clin Microb. 32 (2): p. 477-483. 1994.
Chunge, E.; Roche, C.; Lefevre, M. F.; Barbazan, P.; Chanteau, S. Ultra-Rapid, Simple, Sensitive, and Economical Silica Method for Extraction and Detection of Dengue Viral RNA from Clinical Specimens and Mosquitoes by Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction, J. Med. Virol. 40: p. 142-145. 1993.
Brown, T. M.; Chang, G.-J.; Cropp, C. B.; Robbins, K. E.; Tsai, T. F. Detection of Yellow Fever Virus by Polymerase Chain Reaction, Clin. Diagn. Virology. 2: p. 41-51. 1994.
Deubel, V.; Huerre, M.; Cathomas, G.; Drouet, M. T.; Le Guenno, W. B.; Widmer, A. Molecular Detection and Characterization of Yellow Fever Virus in Blood and Liver Specimens of a Non-Vaccinated Fatal Human Case, J. Med. Virol. 53: p. 212-217.1997.
Kuno, G. Universal Diagnostic RT-PCR Protocol for Arboviruses, J. Virol. Methods. 72: p. 27-41. 1998.
Tanaka, M. Rapid Identification of Flavivirus Using the Polymerase Chain Reaction, J Virol Methodos. 41: p. 311-322. 1993.
White, D. J.; Kramer, L. D.; Backenson, B.; Lukacik, G.; Johnson, G.; Oliver, J.; Howard, J. G.; Means, R. G.; Eidson, M.; Gotham, I.; Kulasekera, V.; Campbell, S. Mosquito surveillance and polymerase chain reaction detection of West Nile Virus, New York State. Emerging Infectious Diseases. 7 (4): p. 643- 649. 2001.
Reinhardt, B.; Jaspert, R.; Niedrig, M.; Kostner, C.; L’age-Stehr, J. Development of Viremia and Humoral and Cellular Parameters of Immune Activation After Vaccination with Yellow Fever Virus Strain 17D: A Model of Human Flavivirus Infection, J Med Virol. 56: p. 159-167.1998.
Rosen, L. On the Mechanism of Vertical Transmission of Dengue Virus in Mosquitoes, C.R. Acad. Sc. Paris. t. 304, Serie III, n 13, p. 347-350. 1987.
Boom, R.; Sol, C. J. A.; Salimans, M. M.; Jansen, C. L.; Wertheim van Dillen, P. M. E.; Van der Nordaa, J. Rapid and Simple Method for Purification of Nucleic Acids, J. Clin. Microbiol. 28: p. 495-503. 1990.
Harris, E.; Roberts, T. G.; Smith, L.; Selle, J.; Kramer, L. D.; Valle, S.; Sandoval, E.; Balmaseda, A. Typing of Dengue Viruses in Clinical Specimens and Mosquitoes by Single-Tube Multiplex Reverse Transcriptase PCR, J Clin Microbiol. 36 (9), p. 2634-2639. 1998.
Chomczynski and Sacchi. Single-Step Method of RNA Isolation by Acid Guanidium Thiocyanate Phenol-Chloroform Extraction, Anal. Chem. 162: p. 156-159. 1987.
Liotta, D. J.; Cabanne, G. S.; Tonon, S. A. Extracción, Purificación y Detección Molecular del Genoma del Dengue Tipo 2 en Mosquitos Aedes aegypti, Rev. Ciencia y Tecnología, CIDeT, 3, p. 47-52. 2000.
Lanciotti, R. A.; Kerst, A. M.; Nasci, R. S.; Godsey, M. S.; Mitchell, C. J.; Savage, H. M.; Komar, N.; Panella, N. A.; Allen, B. C.; Volpe, K. E.; Davis, B. S. Rapid detection of West Nile Virus from human clinical specimens, field-collected mosquitoes, and avian samples by a TaqMan reverse transcriptase-PCR assay. J Clinical Microbiology, Nov, p. 4066–4071. 2000.
Thu, H. M.; Mar Aye, K.; Thein, S. The Effect of Temperature and Humidity on Dengue Virus Propagation in Aedes aegypti Mosquitos. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 29 (2), p. 280-284. 1998.